実験手法解説

【PCR法】すぐにできるマイコプラズマの検出方法解説【プロトコル付き】

・培養細胞の増えが悪くてマイコプラズマがコンタミしているのではないか?

・今すぐにマイコプラズマのコンタミを検出したいけどどうすればいいの?

こんにちは。Hiro(@THiro70217938)です。

この記事では、「ラボにあるツールで比較的かんたんに行える」PCR法によるマイコプラズマの検出方法を紹介していきます。

最近、細胞の増えが悪いけど目立った異常はない」、「細胞が死にやすい」、「細胞を使った実験結果が以前とかなり違う」と困っている人は、マイコプラズマのコンタミが原因となっている可能性があるので、ぜひ参考にしてみてください。

マイコプラズマの検出方法

簡便かつ感度の高いPCR法」をこの記事では紹介します。

1~2日で検出できます。一般的なPCRを行える人であれば問題なく実験ができます。

もっと楽に」、「確実に検出したい」人向けに、検出kitもまとめたので参考にしてください。

PCR法(ネスティッドPCR)

こちらの論文を参考にしています。『培養細胞系でのマイコプラズマのPCR検出法』。

ネスティッドPCR法という、2回PCRを行うことで少ないDNAからでもDNAを大量に増幅できる方法を使います。少し時間がかかりますが検出感度が良いのが特徴です。

以下がプロトコルになります。

ネスティッドPCRによるマイコプラズマ検出法のプロトコル

マイコプラズマ検出用Kit

確実にマイコプラズマのコンタミを判断したい人は、さまざまなkitが売られているのでkitを試してみるのもいいと思います。

EZ-PCRマイコプラズマPCR検出キット(コスモバイオ)

VenorGeM Classic Mycoplasma Detection Kit(フナコシ)

TaKaRa PCR Mycoplasma Detection Set(TaKaRa)

LookOutマイコプラズマPCR検出キット(Sigma)

マイコプラズマの除去試薬

マイコプラズマが検出されてしまったら、細胞を新しいものにするかマイコプラズマの除去を行うする必要があります。

マイコプラズマの除去を考えている人は以下に除去試薬をまとめたので参考にしてください。

マイコプラズマ除去用抗生物質BIOMYCシリーズ(コスモバイオ)

Mynox-Mycoplasma Elimination Kit(フナコシ)

LookOutマイコプラズマ除去キット(Sigma)

マイコプラズマの予防試薬

マイコプラズマのコンタミリスクを減らすためには予防試薬も売られています。こちらもまとめたので参考にしてください。

感染予防用殺菌剤Pharmacidal, AQUAGUARD(コスモバイオ)

水に添加して雑菌の繁殖を抑える試薬WaterShield(フナコシ)

抗菌スプレー Mycoplasma-Off(フナコシ)

ウエットワイパーMycoplasma-OffWipe(フナコシ)

Mycoplasma-EXS-Spray(TaKaRa)

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